产品货号：
ALH260
中文名称：
耐热反转录酶
英文名称：
HotScript M-MuLV RTase
产品规格：
10KU|50KU
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
HotScript M-MuLV RTase对M-MuLV经过多点突变，提高了反转录温度耐受性，可以在高达55℃～60℃（更高温度反转时活性会部分减低）进行反转录，大大的提高了GC含量高，二级结构丰富的RNA模板的反转录效率。
HotScript M-MuLV RTase缺失了RNase H活性，与野生型M-MuLV相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。合成cDNA片段长度最高可达12kb。
保存：-20℃
一、第一链cDNA合成
相关搜索：耐热反转录酶，高温反转录酶，耐热M-MuLV反转录酶，耐热M-MuLV RTase，耐热逆转录酶，HotScript M-MuLV RTase
HotScript M-MuLV RTase缺失了RNase H活性，与野生型M-MuLV相比，具有更强的延伸能力和稳定性，可用于较长的cDNA合成以及高比例的全长cDNA文库的构建等。合成cDNA片段长度最高可达12kb。
| 组分 | 10KU | 5×10KU |
| HotScript M-MuLV RTase(200U/μL) | 50μL | 5×50μL |
| 5×RT Buffer | 500μL | 5×500μL |
保存：-20℃
- 避免RNase污染。
- 为保证反转录成功建议使用高质量的RNA样品。
- 如果RNA模板GC含量丰富或者有复杂二级结构，可以先只加RNA模板、引物和和RNase-free H2O混匀，65℃变性5分钟，冰上冷却，短暂离心后加入其它成分继续下面的反转录步骤。
- HotScript M-MuLV RTase溶液非常粘稠，溶液容易吸附在管壁和吸头外导致损失，用前请点甩离心后使用，并且避免吸头外壁沾附损失。可以每次按照0.8μL使用，也不影响使用效果。
一、第一链cDNA合成
- 配置反应体系(20μL)
成分 用量 Total RNA/mRNA 50ng～5μg/5～500ng Oligo(dT)18(0.5μg/μL)
or Random Primer(0.1μg/μL)
or GSP(Gene Specific Primer)1μL 1μL 2pmol dNTP Mixture (10mM each) 1μL 5×RT Buffer 4μL RNase Inhibitor(40U/μL) 0.5μL HotScript M-MuLV RTase(200U/μL) 0.8～1μL (见注意事项4) RNase-free H2O 至20μL - 轻轻混匀
如用Oligo(dT)18或基因特异引物(GSP)，50℃～55℃孵育30～50min。
如用Random Primer，23℃孵育10min，50℃～55℃孵育30～50min。 - 85℃加热5min失活HotScript M-MuLV RTase。
注意：GC含量高(>50%)或者二级结构复杂模板，可以提高反转录温度至60℃左右。
相关搜索：耐热反转录酶，高温反转录酶，耐热M-MuLV反转录酶，耐热M-MuLV RTase，耐热逆转录酶，HotScript M-MuLV RTase